本发明公布了一种棉蚜性母、雄蚜、性雌室内高效诱导方法,本发明属于农业害虫防治领域。自然条件下,棉蚜性母、雄蚜、性雌每年仅发生一代,现有诱导方法需耗时3~5代才能诱导出雄蚜、性雌,但总是混杂有无性孤雌蚜,且步骤繁琐。针对该技术难题,本发明首先提供了一种棉蚜孤雌蚜饲养方法,并设计了一种棉蚜有性蚜诱导装置,将子叶期棉苗移栽入该装置中,并接种1龄孤雌若蚜,而后将其置于低温短光照下持续饲养,孤雌蚜发育为成虫即可产生性母、雄蚜,性母发育为成虫时可产生性雌。本发明操作简便、快速高效,可在短时期内诱导出批量化、发育整齐的棉蚜性母、雄蚜、性雌,将促进棉蚜基础生物学的研究,为新的棉蚜防控策略开发奠定基础。