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本发明公开了一种同时鉴定棉花细胞质雄性不育恢复基因Rf1、Rf2的InDel标记。该InDel标记，不仅与哈克尼西棉细胞质雄性不育恢复基因Rf1连锁而且与三裂棉细胞质雄性不育恢复基因Rf2连锁，该核苷酸序列的插入/缺失长度多态性呈现在琼脂糖凝胶电泳图上可鉴定棉花单株是否含有恢复基因且能判定含有恢复基因的类型，该InDel标记由SEQ ID NO.1‑2所示的引物扩增得到。该InDel标记对不同恢复基因(Rf1/Rf2)的棉花新恢复系材料的选育和保证三系杂交种种子纯度方面具有重要作用。本InDel标记可以鉴定棉花的两套细胞质雄性不育的不同的恢复基因类型，其适用范围更广，实用性更好。