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本发明公开了棉花胚性愈伤组织与胚状体的培养方法。本发明公开的棉花胚性愈伤组织的培养方法，包括：将棉花外植体于红光下培养，得到棉花愈伤组织；愈伤组织为胚性愈伤组织；红光的光量子通量密度为40‑65μmol/m2.s；所用培养基由溶剂和溶质组成，溶剂为水，溶质及在培养基中的浓度分别为IAA 0.02mg/L，KT 0.06mg/L，蔗糖30g/L，Gelrite 2g/L，MgCl2 0.5g/L，pH 5.8。本发明的方法，可以对棉花各个时期进行精确调控，可以大幅度的提高各个时期的分化效率，缩短分化周期，极大的提高了棉花再生体系的效率，为棉花遗传转化方法提高了转化效率。