本发明公开了棉花胚性愈伤组织与胚状体的培养方法。本发明公开的棉花胚性愈伤组织的培养方法,包括:将棉花外植体于红光下培养,得到棉花愈伤组织;愈伤组织为胚性愈伤组织;红光的光量子通量密度为40‑65μmol/m2.s;所用培养基由溶剂和溶质组成,溶剂为水,溶质及在培养基中的浓度分别为IAA 0.02mg/L,KT 0.06mg/L,蔗糖30g/L,Gelrite 2g/L,MgCl2 0.5g/L,pH 5.8。本发明的方法,可以对棉花各个时期进行精确调控,可以大幅度的提高各个时期的分化效率,缩短分化周期,极大的提高了棉花再生体系的效率,为棉花遗传转化方法提高了转化效率。